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配制台式利记官网APP下载网址密度梯度溶液的方法

发布时间:2017-07-03      点击次数:2286

  前两天小编给大家讲解了台式利记官网APP下载网址密度梯度离心法和梯度介质的回收,为了让大家对此问题认识更全面,今天给大家科普下密度梯度溶液的配制方法。配置密度梯度溶液,一般情况下是先配制高浓度储备液,再用缓冲液稀释到需要的浓度,阶梯梯度配制若干个不同密度的溶液,连续梯度一般配制两种密度的溶液,其中一种是梯度的大密度,另一种是梯度的小密度。

  用各种离心机转子在梯度介质中分离颗粒时,使用两种形式的梯度,即自形成梯度和预形成梯度。自形成梯度是梯度介质在离心场作用下颗粒重新分布,形成从顶部到底部逐渐增加密度的液柱。预形成梯度是指在离心之前,用梯度形成仪或人工的方法预先制备密度梯度柱。按照梯度结构可分为不连续梯度(即阶梯度)和连续梯度两种类型。连续梯度又有线性梯度、指数梯度、对数梯度和复合梯度。有时为了速率区带离心分离的方便,又设计了等动力梯度,为了防止在区带转子中的径向稀释,设计了等体积梯度。配置密度梯度溶液需要注意很多事项。

  碱金属盐溶液在4℃下可以长期保存,但含碘的物质应避光保存,多元醇易受微生物污染,保存在-20℃使用时不方便。好临时配置。有些使用利记官网下载地址 进行离心需要在无菌条件下进行,但高压消毒对有些梯度介质会带来一些不利影响,如引起Percoll颗粒不稳定,配制时可只对稀释剂进行消毒,碘化梯度介质中只有Metrizamide可以进行高压消毒。溶解多糖是先给粉剂里加入少许水搅拌,使之成为半透明的糊状,再稀释到所需体积。如果直接把大量水或缓冲液加到多糖粉剂里,会形成大量凝块。可用比重瓶或折射仪测定梯度溶液的密度和所有介质的密度分布,用下述方程能快速地根据折射率计算溶液的密度:

ρ=An-B 
式中,A和B的值随着梯度介质和温度的变化而不同,如用0.8% NaCl、120mmol/L Tricine-NaOH配制的等渗Iodixanol梯度中,A=3.2984,B=3.3967。

储存液与稀释剂间通过混合得到的溶液密度可用下式计算:

图片1.png

式中,D为所需密度;V为储存液的体积;d为储存液的密度;V1为稀释液的体积;d1为稀释液的密度。
  经过小编的讲解,大家是否清楚了蜀科
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